服務(wù)熱線
400-021-2200
| 品牌 | GORNING/康寧 | 貨號 | 88-570-kit |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1kit | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | NK細胞的大量擴增 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
康寧Corning NK細胞活化擴增培養(yǎng)基套裝
康寧Corning NK細胞活化擴增培養(yǎng)基套裝提供了NK 細胞活化擴增的全套材料和標(biāo)準(zhǔn)操作方法，所得NK細胞擴增能力強，活性和殺傷能力高。研究者無需優(yōu)化，而且使用步驟精簡。和競爭產(chǎn)品比較了NK細胞產(chǎn)量，活力和NK 細胞體外 陽性表達比率和殺傷能力。
產(chǎn)品訂購信息
品牌 貨號 產(chǎn)品描述 包裝
Corning 88-570-kit NK細胞活化/擴增培養(yǎng)基套裝 1kit
康寧Corning NK細胞活化擴增培養(yǎng)基套裝組成
NK細胞活化培養(yǎng)基
NK細胞活化添加劑
NK細胞擴增培養(yǎng)基
抗體預(yù)包被T75細胞培養(yǎng)瓶
細胞培養(yǎng)袋
康寧Corning NK細胞活化擴增培養(yǎng)基套裝特色
擴增能力強，在14天內(nèi)可達到100倍擴增
效應(yīng)細胞比例高，可達80％
操作方便
自然殺傷（NK）細胞是可識別和殺死腫瘤和病毒感染的關(guān)鍵免疫細胞。 NK細胞是當(dāng)今免疫-治療常用的細胞。但是NK細胞培養(yǎng)操作難度大，對培養(yǎng)條件、培養(yǎng)技術(shù)要求很高，難以獲得高純度高效能的活性細胞。過度免疫-治療所必需的離體NK細胞很難獲得。 已經(jīng)報道了幾種NK激活/擴增方法，其使用擴增介質(zhì)加各種細胞因子（例如IL-2，IL-7和IL-15）。 然而，這些需要研究人員的進一步優(yōu)化。
Corning NK細胞活化擴增培養(yǎng)基套裝NK細胞體外擴增試劑盒包含預(yù)先涂覆的T-75燒瓶，50mL NK原代培養(yǎng)基，1.8mL NK Primary補充劑和1L NK擴增培養(yǎng)基。 NK細胞體外擴增試劑盒前三個組分是專為NK細胞激活設(shè)計的，而NK擴增培養(yǎng)基用于NK細胞的擴增。 NK初級培養(yǎng)基和NK膨脹培養(yǎng)基都使用高品質(zhì)試劑和cGMP級原料制造。 NK細胞體外擴增試劑盒存在于培養(yǎng)基中的weiyi蛋白質(zhì)是血清白蛋白和重組人胰島-素的可注射水平。
Corning NK細胞活化/擴增培養(yǎng)基套裝由多個組分組成，為NK細胞培養(yǎng)提供簡便的操作方案。使用Corning NK細胞活化擴增培養(yǎng)基套裝所獲得細胞數(shù)量產(chǎn)量高，活性高，具有很高的殺傷效應(yīng)。
關(guān)于使用該試劑盒激活和擴增的細胞的增殖率，免疫表型和CCK-8細胞毒性測試的信息，請參閱Corning應(yīng)用筆記使用康寧NK擴增試劑盒（CLS-CG-AN-427）進行人類天然殺傷細胞擴增。
NK 細胞活化擴增培養(yǎng)基套裝操作方法
1. 抗凝血室溫離心，400 xg，10min，上層血漿轉(zhuǎn)移到新管。
2. 熱滅活自體血漿，56°C，30min。離心， 800 xg ， 20 min，去除沉淀。4°C 保存上清血漿，培養(yǎng)備用。
3. 加入等體積PBS（不含鈣鎂）替代被移除血漿保持體積不變，小心重懸血細胞。
注意：PBS預(yù)加0.1%人血清白蛋白（HSA）利于保持血細胞活性。
4. 使用淋巴細胞分離液從上面的血樣中制備PBMCs（人外周血單個核細胞）。
注意：使用新鮮采集的人血（2h內(nèi)采集）有利培養(yǎng)，不要使用超過24h的血樣。
5. 至少5倍體積的PBS（不含鈣鎂）清洗PBMCs。室溫離心500xg，10min，收集PBMCs。
6. PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL，使用NK活化培養(yǎng)基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
7. 預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶使用前，用PBS（不含鈣鎂）清洗兩次。
8. 添加30 mL PBMC懸液到預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶，37°C，5% CO2培養(yǎng)。
注意：第六天之前，如果培養(yǎng)基變黃，細胞密度超過2.0 x 106 cells/mL，需要添加新鮮的NK活化培養(yǎng)基配比10%自體血漿，保持細胞密度大于 5 x 105 cells/mL。
9. 培養(yǎng)第六天，培養(yǎng)液離心，適量NK擴增培養(yǎng)基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）重懸細胞，再轉(zhuǎn)移到T-225培養(yǎng)瓶或透氣細胞培養(yǎng)袋。
10. 每隔兩三天，根據(jù)細胞擴增狀態(tài)，培養(yǎng)體系中添加新鮮的NK擴增培養(yǎng)基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）保持細胞密度在5 x 105到 2.0 x 106 cells/mL之間。
注意：NK擴增階段，所加新鮮培養(yǎng)基自體血漿含量推薦范圍：0.5%-1%。
11. 培養(yǎng)14天左右，收獲NK細胞。
注意：整個實驗過程中，細胞懸液吹打和培養(yǎng)容器拍打都要輕柔，以避免細胞損傷，保持細胞活性。
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